NKA和AnkG在HBE细胞膜中的定位 一

为了在HBE细胞膜中定位特定蛋白NKA和AnkG，我们利用AFM-dSTORM联用对细胞膜进行成像。如图A-C所示，AFM图像显示了细胞膜的整体结构；相应的dSTORM图像分别显示了特定蛋白AnkG和NKA的空间分布。通过匹配AFM和双色dSTORM图像，我们获得了联用图像，并揭示了AnkG和NKA在细胞膜形貌图中的分布（图D）。通过观察图21E中的放大视图，发现细胞膜边缘延伸的纤毛结构中有AnkG蛋白定位，但没有NKA蛋白定位，表明AnkG蛋白是纤毛结构中的组成成分。
为了观察特定蛋白AnkG和NKA在细胞膜内部区域中的定位分布，我们将细胞膜的高分辨率AFM图像与相应的双色dSTORM图像进行了关联。如图A-C所示，高分辨率AFM图像显示了MPs在整个水平上的纳米组织模式；相应的dSTORM图像分别显示了特定蛋白AnkG和NKA在细胞膜胞质侧的纳米组织模式。通过叠加高分辨率AFM图像和相应的双色dSTORM图像，可获得图D-F所示的联用图像。从这些联用图像中，我们发现几乎所有的AnkG和NKA蛋白都定位在颗粒状凸起物上。有趣的是，我们还发现存在AnkG和NKA蛋白同时定位在相同颗粒状凸起物中。综上，结果表明，AFM图像中的颗粒状凸起物被确定为含有相同或不同蛋白分子的蛋白岛。

  如图   特定蛋白AnkG和NKA在HBE细胞膜形貌图中的分布。（A）AFM图像显示了HBE膜的完整结构。（B，C）相应的dSTORM图像分别显示AnkG（B）和NKA（C）蛋白在细胞膜胞质侧的分布。（D）图A-C的叠加图显示AnkG和NKA在细胞膜形貌中的分布。（E）图D中蓝色方框区域的放大视图。标尺：5 mm（A-D）和500 nm（E）。